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性取向的形成是先天基因与后天环境共同作用的结果，主要影响因素包括遗传因素、激素水平、大脑结构差异、孕期环境以及社会文化因素。
双生子研究表明同卵双胞胎性取向一致性显著高于异卵双胞胎，X染色体q28区域与男性同性恋倾向存在关联。但尚未发现单一"同性恋基因"，目前认为多基因微效累积作用更可能解释遗传影响。
胎儿期雄激素暴露程度可能影响性别认同发展。男性同性恋者通常表现出更女性化的指长比2D：4D，这与产前睾酮水平较低相关。但激素理论无法解释所有性取向差异。
下丘脑前部第三间质核INAH3在男同性恋者中更接近异性恋女性尺寸。前连合纤维束大小在同性恋男性中显著大于异性恋男性，这些神经解剖学差异提示先天生物学基础。
母体免疫反应假说认为，男性胎儿可能引发母体产生抗Y染色体蛋白抗体，影响后续男性胎儿大脑性别分化。该理论能解释兄弟数量与同性恋概率的正相关现象。
虽然性取向具有生物学基础，但社会文化因素会影响性行为表达方式。某些文化中流动性取向更常见，说明环境对性取向表现存在调节作用，但不会改变核心取向。
现有证据表明性取向在青春期前就已基本形成，个人无法自主选择。建议避免将性取向简单归因于单一因素，尊重个体差异更为重要。保持均衡饮食、规律运动有助于维持激素水平稳定，但尚无科学证据表明特定生活方式能改变性取向。若因性取向问题产生心理困扰，可寻求专业心理咨询帮助，而非试图强行改变。
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